Skip to content

Wywołana transfekcją ekspresja dominującego fenotypu opornego na cAMP w linii komórkowej nerki oposowej (OK) zapobiega indukowanemu przez gruczoł hormonalny hamowaniu krotransportu Na-fosforanu. Zdarzenie związane z kinazą białkową A.

4 miesiące ago

240 words

Krotransport sodowo-fosforanowy w linii komórkowej nerki opsowej reagującej na PTH (OK) jest hamowany przez PTH, cAMP i aktywatory kinazy białkowej C. W celu sondowania roli cAMP, stabilnie transfekowaliśmy komórki OK wektorem ekspresyjnym mutacja wiązania cAMP podjednostki regulatorowej mysiej kinazy białkowej A. Dwuwymiarowa elektroforeza białek wiążących cAMP z transfekowanych komórek wykazała 20-krotną nadekspresję zmutowanej jednostki regulatorowej. Kinaza białkowa A z tych komórek miała 20-krotny wzrost stężenia cAMP wymaganego do połowy maksymalnej aktywacji, 2,8 mikroM vs. 0,15 mikroM dla komórek typu dzikiego. W transfekowanych komórkach, krotransport Na-fosforanu był niewrażliwy na do mM 8-Br-cAMP i mikroM PTH, podczas gdy ci sami agoniści powodowali znaczące hamowanie transportu w komórkach typu dzikiego. Wpływ na kotransport Na-fosforanu aktywatorów kinazy białkowej C, oleoilo-acetyloglicerol i octan tetradekanoilo-forbolu, które zostały oznaczone w komórkach typu dzikiego, był nadal obecny, chociaż osłabiony, w transfekowanych mutantach. Przy przedłużonym pasażowaniu fenotyp niewrażliwy na cAMP powrócił do czułości cAMP typu dzikiego pomimo kontynuacji selekcji do kotransfekowanego markera neo. Rewitacyjne komórki miały normalny wymóg cAMP dla połowy maksymalnej aktywacji kinazy białkowej A, 0,13 mikroM, i przywrócono wrażliwe na PTH i cAMP hamowanie krotransportu Na-fosforanu. Sugerujemy, że nienaruszony i normalnie wrażliwy na cAMP szlak kinazy białkowej A jest bezwzględnym wymogiem dla hamowania kotwiczenia przez PTH cytotransferu fosforanowego w komórce OK.
[podobne: neosine syrop opinie, gamma glutamylotranspeptydaza, pękające pięty przyczyny ]

0 thoughts on “Wywołana transfekcją ekspresja dominującego fenotypu opornego na cAMP w linii komórkowej nerki oposowej (OK) zapobiega indukowanemu przez gruczoł hormonalny hamowaniu krotransportu Na-fosforanu. Zdarzenie związane z kinazą białkową A.”