Skip to content

Rola antagonisty sygnałowego Wnt DKK1 w rozwoju zmian osteolitycznych w szpiczaku mnogim ad 7

3 miesiące ago

535 words

Wpływ rekombinowanego DKK1 (rhDKK1) i osocza szpiku kostnego od pacjentów ze szpiczakiem mnogim na wytwarzanie alkalicznej fosfatazy w komórkach C2C12 traktowanych białkiem morfogenetycznym kości typu 2 (BMP-2). W panelu A, poziomy fosfatazy alkalicznej, marker różnicowania osteoblastów, mierzono w komórkach C2C12 po pięciu dniach hodowli w obecności 5 procent surowicy płodowej cielęcej sam lub z 50 ng BMP-2 na mililitr; BMP-2 i 50 ng rhDKK1 na mililitr; BMP-2, rhDKK1 i przeciwciało anty-DKK1; lub BMP-2, rhDKK1 i poliklonalne IgG. Każdy pasek reprezentuje średnią (. SE) potrójnych eksperymentów. Aktywność fosfatazy alkalicznej wzrosła w obecności BMP-2 i została znacząco zmniejszona przez koinkubację z rhDKK1. Przeciwciało anty-DKK1, ale nie poliklonalne IgG, blokowało hamującą aktywność rhDKK1. Wartości P są przeznaczone do porównania z samym BMP2. W panelu B poziomy fosfatazy alkalicznej mierzono w komórkach C2C12 po hodowaniu tych komórek przez pięć dni w 5 procentowej surowicy płodowej; 50 ng BMP-2 na mililitr i 10% normalnego osocza szpiku kostnego; BMP-2 i 10% osocza szpiku kostnego od 10 pacjentów ze świeżo rozpoznanym szpiczakiem; BMP-2, 10% osocza szpiku kostnego od pacjentów i przeciwciała anty-DKK1; lub BMP-2, 10% osocza szpiku kostnego od pacjentów i kozie poliklonalne IgG. Każdy pasek reprezentuje średnią (. SE) potrójnych eksperymentów. Poziom DKK1 w każdej próbce osocza szpiku kostnego (pokazany w nawiasach poniżej wykresu) oznaczono za pomocą testu immunoenzymatycznego, a końcowe poziomy w kulturze po rozcieńczeniu 1:10 wskazano. Próbki zawierające więcej niż 12 ng DKK1 na mililitr miały wpływ na wytwarzanie fosfatazy alkalicznej, która może być znacznie hamowana przez przeciwciało anty-DKK1. Wartości P służą do porównania poziomów fosfatazy alkalicznej w odpowiedzi na BMP-2 z 10 procentową surowicą iw odpowiedzi na BMP-2, 10 procentową surowicę i anty-DKK1 u wszystkich 10 pacjentów. Białko morfogenetyczne kości typu 2 (BMP-2) może indukować różnicowanie niezautomizowanej mezenchymalnej linii komórek progenitorowych C2C1224 w osteoblasty poprzez mechanizm, który obejmuje sygnalizację Wnt / .-kateninę.25,26 Tylko małe ilości fosfatazy alkalicznej, swoisty marker różnicowanie osteoblastów było wykrywalne w komórkach C2C12 hodowanych w 5 procentach surowicy płodowej przez pięć dni (Figura 4A). Traktowanie komórek C2C12 50 ng BMP-2 na mililitr przez pięć dni indukowało je do wytwarzania alkalicznej fosfatazy, podczas gdy fosfataza alkaliczna była hamowana w komórkach C2C12, które były jednocześnie hodowane z BMP-2 i 50 ng rekombinowanego ludzkiego DKK1 na mililitr. Ten wpływ in vitro na wytwarzanie fosfatazy alkalicznej był neutralizowany przez poliklonalne przeciwciało anty-DKK1, ale nie przez nieswoiste poliklonalne kozie IgG. Osocze szpiku kostnego z poziomem DKK1 większym niż 12 ng na mililitr, uzyskane od pięciu pacjentów ze szpiczakiem, hamowało wytwarzanie fosfatazy alkalicznej przez komórki C2C12 traktowane BMP-2, i efekt ten był odwracany przez przeciwciało anty-DKK1, ale nie przez niespecyficzną IgG (Figura 4B). Przeciwnie, komórki C2C12 traktowane 50 ng BMP-2 na mililitr i 10% osocza ze szpiku kostnego osobnika kontrolnego indukowały wytwarzanie alkalicznej fosfatazy przez komórki (Figura 4B).
Dyskusja
Korzystając z mikromacierzy oligonukleotydowych, zbadaliśmy ekspresję około 10 000 genów za pomocą oczyszczonych komórek plazmatycznych ze szpiku u 137 pacjentów zi 36 bez wykrywalnych zmian kostnych w momencie rozpoznania szpiczaka mnogiego
[więcej w: belimumab, ambrisentan, cilostazol ]
[więcej w: olx nowa ruda, lodowaty kwas octowy, abrazja ginekologia ]

0 thoughts on “Rola antagonisty sygnałowego Wnt DKK1 w rozwoju zmian osteolitycznych w szpiczaku mnogim ad 7”