Skip to content

Testy laboratoryjne

4 tygodnie ago

206 words

width=300Próbki krwi zostały przetransportowane do jednego centralnego laboratorium (czas podróży poniżej 1 godziny od każdego OIT) do analizy przez personel biegły we wszystkich technikach opisanych poniżej. Limfocyty obojętnochłonne pacjentów wyizolowano z cytrynianowej krwi pełnej przez sedymentację dekstranu i nieciągły gradient Percoll. Fagocytozę neutrofilów oznaczono ilościowo jako procent neutrofilów przyjmujących ≥2 cząsteczki zymosanu (pochodzące ze ściany komórkowej drożdży Saccharomcyes cerevisiae), które opsonizowano przy użyciu surowicy od tego samego pacjenta, u którego oceniano neutrofile. Neutrofile inkubowano z oplewionymi surowicą cząstkami zymosanu przez 30 minut i określono spożycie dwóch lub więcej cząstek w mikroskopie świetlnym.

Chemotaksję neutrofili w odpowiedzi na formyl-metioninę-leucynę-fenyloalaninę oszacowano za pomocą metody subagarozowej i generowania nadtlenku za pomocą testu redukcji cytochromu c. apoptozę neutrofili zmierzono za pomocą analizy cytometrii przepływowej aneksyny V i jodku propidyny w pełnej krwi. Ekspresję monocytów HLA-DR w krwi pełnej oszacowano za pomocą cytometrii przepływowej przy użyciu zestawu Quantibrite (BD Biosciences, Oxford, UK) . Stężenia interleukiny (IL) 1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70 TNFα i GM-CSF oznaczono za pomocą cytometrycznej struktury perełek (Becton Dickinson). Całą cytometrię przepływową przeprowadzono przy użyciu cytometru przepływowego FACSCanto II (Becton Dickinson).

0 thoughts on “Testy laboratoryjne”