Skip to content

szpital w grudziądzu neurochirurgia

3 miesiące ago

565 words

Oprócz ograniczonego dostępu do preparatów z wysepek ludzkich i dużej zmienności od jednego dawcy do drugiego,. komórki reprezentują jedynie podfrakcję komórek obecnych w preparatach wyspowych, które zawierają inne typy komórek endokrynnych, ale także komórki zewnątrzwydzielnicze (16, 17). Ten brak. czystość komórek w takich preparatach stanowi ograniczenie w interpretacji danych pochodzących z analizy transkryptomicznej. W tym przypadku porównawcze analizy transkrypcyjne wskazały, że komórki EndoC-aH2 wyrażały zbiór. geny specyficzne dla komórek, które można znaleźć również w preparatach ludzkich komórek wyspowych. Co więcej, podczas gdy ekspresja wielu markerów zewnątrzwydzielniczych została wykryta w preparatach ludzkich komórek wyspowych, nie było tak w przypadku komórek EndoC-aH2. Taka nowa linia komórkowa będzie zatem przydatna w eksperymentach, w których duża liczba czystych insuliny produkujących ludzką trzustkę. komórki są potrzebne. W przeszłości stosowano wiele podejść do produkcji warunkowo unieśmiertelnionych linii komórkowych. Termoczuły wariant SV40 LT i podejścia oparte na regulacji ekspresji SV40 LT za pośrednictwem tetracykliny zostały użyte do opracowania odpowiednio progenitorowych linii komórek prokariotycznych myszy (18) i myszy. linie komórkowe (19). Kontrolę unieśmiertelniania ekspresji transgenu uzyskano również w bardziej trwały sposób. Warunkowo unieśmiertelnione linie komórkowe wytworzono po za pomocą retrowirusowej stabilnej integracji unieśmiertelnionych transgenów flankowanych przez miejsca loxP, umożliwiając ich wycięcie za pośrednictwem rekombinazy Cre (20. 22). Podobne podejścia zastosowano do wytworzenia odwrotnie unieśmiertelnionych ludzkich komórek śródbłonka sinusoidalnego wątroby i. komórki (23, 24) i linie komórek progenitorowych wątroby naczelnych (25). Jednak pierwszy. linia komórkowa rozwinięta tym sposobem szybko traciła ekspresję insuliny (23). Druga linia, NAKT-15, zgłoszona w 2005 r. (24), nie była dalej badana ani rozpowszechniana pomimo jej obiecujących. właściwości specyficzne dla komórki. Ponadto, po delecji SV40 LT z udziałem Cre w linii komórek progenitorowych wątroby naczelnych, komórki wykazywały piknotyczną lub pofragmentowaną charakterystykę jądrową apoptozy i zmarły, co sugerowano, że jest spowodowane akumulacją p53 (25). Tutaj użyliśmy ekscytujących wektorów lentiwirusowych do wygenerowania stabilnego warunkowo unieśmiertelnionego funkcjonalnego człowieka. linia komórkowa. Stwierdziliśmy, że unieśmiertelnianie transgenów można skutecznie usunąć w ponad 90% komórek EndoC-aH2, powodując zatrzymanie wzrostu komórkowego. Wykazało to, że proliferacja była zależna od ekspresji transgenu. W naszej obecnej pracy śmierć komórki po ekspresji Cre była drobnym zjawiskiem, a komórki przetrwały skutecznie przez co najmniej 3 tygodnie po wycięciu. W rzeczywistości, większość eksperymentów przeprowadziliśmy 3 tygodnie po transdukcji Cre, i nie tylko przeżyły komórki wycięte, ale wyrazem wielu markerów zróżnicowanych. komórki wzrosły. Tak było w przypadku insuliny i polipeptydu amyloidu wyspowego (IAPP), który jest pierwotnie koepresowany i wytwarzany razem z insuliną. komórki (26). Dotyczy to również transportera glukozy SLC2A2, ABCC8 i KCNJ11 oraz RAB3A, które są zaangażowane w stymulowane glukozą wydzielanie insuliny (27). Nasze dane wskazują zatem, że poprzez usunięcie unieśmiertelnionych transgenów i zablokowanie proliferacji komórek, zwiększyliśmy. status różnicowania komórek. . Komórki są wysoce zróżnicowanymi komórkami z więcej niż 30% mRNA, który koduje insulinę (28). Rozwijanie i utrzymywanie takiego zróżnicowanego statusu jest aktywnym procesem, który wymaga energii (29). Energia jest również niezbędna do proliferacji komórek. Mamy więc hipotezę, że obserwowany wzrost. status różnicowania komórek po zatrzymaniu wzrostu komórek odzwierciedla klasyczną, ale jeszcze nie w pełni wyjaśnioną równowagę pomiędzy procesami proliferacji i różnicowania komórek
[hasła pokrewne: podgłośniowe zapalenie krtani, lodowaty kwas octowy, abrazja ginekologia ]

0 thoughts on “szpital w grudziądzu neurochirurgia”