Skip to content

ul przyjazna katowice

1 miesiąc ago

580 words

Brak efektu pourodzeniowego w zespole LIGIV lub pacjentów z niedoborem XLF może być konsekwencją ich hipomorficznych zmian mutacyjnych. Co ważne, wyróżniającą cechą NHEJ u naczelnych w porównaniu do wszystkich innych kręgowców jest wyjątkowo wysoki poziom ekspresji wszystkich 3 polipeptydów składowych DNA-PK. Rzeczywiście, białko DNA-PK i aktywność enzymatyczna jest około 50-krotnie wyższa w komórkach ludzkich versus myszy (16, 50). Nie wpływa to jednak na szybkość naprawy DSB ani na odporność na promieniowanie, które, jak to omówiono powyżej, są podobne u gryzoni i ludzi. DNA-PK chciwie wiąże się z końcami DSB, zapobiegając ich resekcji przez egzonukleazy. Badanie dawek DNA-PK w modelach linii komórkowej sugeruje, że istnieje odwrotna korelacja między ekspresją DNA-PKcs a zastosowaniem rekombinacji homologicznej (HR), alternatywnym procesem naprawy DSB (30). Zgodnie z tym modelem, Hendrickson i współpracownicy zauważyli, że utrata telomerów w komórkach Ku lub PKC z niedoborem pR odbywa się za pośrednictwem HR i jest zależna od dawki (np. Komórki haplodeficient mają skromny fenotyp utraty telomeru, ref. 28, 29). . Podobnie skuteczność celowania, w której pośredniczy HR, zwiększa się w sposób zależny od dawki (51). Sugerowaliśmy, że różne wymagania dotyczące poziomów DNA-PK u ludzi mogą odzwierciedlać bardziej rygorystyczny wymóg regulacji HR w regionach hiper-rekombinogennych genomów (30, 52). Tak więc wysoka ekspresja DNA-PK u naczelnych może sugerować unikalną konieczność powstrzymania HR lub innych szlaków naprawy DSB, które mogą być szczególnie ważne podczas rozwoju neuronów. W tym kontekście godne uwagi jest to, że nasza analiza zarodków LigIVY288C ujawniła, że znaczące poziomy DSB powstają w embrionalnych neuronalnych macierzystych i wczesnych komórkach progenitorowych w sposób czasowo związany ze stopniem szybkiej replikacji (22). Chociaż poprzednie badania sugerują, że naprawy rezonansowe związane z replikacją HR wymagają HR, ligaza IV DNA jest wyraźnie wymagana do naprawy endogennych DSB, które powstają w sposób związany z szybką replikacją. Co ważne, zapotrzebowanie na skuteczną naprawę w tej tkance wynika nie tylko z wysokiego tworzenia DSB, ale także z niskiego progu aktywacji apoptozy z niesprawdzonych DBS (22). W związku z tym proponujemy, aby wysoka ekspresja białek DNA-PK u naczelnych była przynajmniej częściowo konieczna do zapewnienia skutecznej naprawy przez NHEJ, a nie HR podczas rozwoju neuronów. Zarodkowy rdzeń neuronalny i wczesne komórki progenitorowe mogą być szczególnie podatne na utratę PKC DNA ze względu na wysoką częstotliwość komórek fazy S / G2, fazę cyklu komórkowego, w której funkcjonuje HR, i gdzie zachodzi chęć resekcji, etap inicjacji HR. Podsumowując, przedstawiamy pierwszą identyfikację pacjenta z głęboką wadą poziomów i aktywności DNA-PKcs. Oprócz spodziewanego fenotypu SCID, pacjent wykazał znacznie upośledzony rozwój neurologiczny i postępującą atrofię mózgu, czego nie przewidziano na podstawie modeli zwierzęcych. Nasze odkrycia sugerują, że wysoka ekspresja białek składowych DNA-PK u naczelnych jest wymagana, przynajmniej częściowo, w celu zapewnienia skutecznego rozwoju embrionalnego neuronów, co, jak postulujemy, może być konieczne, aby uniknąć naprawy DSB przez HR. Metody Kultura komórkowa. Pierwotnymi liniami fibroblastów były 48BR i 1BR3 (kontrola), F02 / 385 (Artemis null), 180BR i 495BR (zespół LIGIV), NM720 (pacjent) i 709BR (matka) (8). hTERT przedstawia unieśmiertelnione pochodne. MO59K i MO59J to odpowiednio linie komórkowe glioblastoma (53) wykazujące ekspresję lub brak ekspresji DNA-PKa3. Komórki hodowano w MEM z 15% FCS, penicyliną / streptomycyną i 1-glutaminą w 37 ° C i 5% CO2. V3 (komórki CHO z niedoborem DNA-PKcsa) hodowano w P-MEM suplementowanym 10% FCS, penicyliną / streptomycyną i cyprofloksacyną
[hasła pokrewne: krosta na wardze sromowej, wbc podwyższone, ślepota zmierzchowa ]

0 thoughts on “ul przyjazna katowice”